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植物总RNA提取试剂盒F1602(柱式)
该试剂盒采用独特的纯化体系,步骤简,质量高,可方便快捷高质且特异地从各种植物(含各种多糖多酚植物)材料中纯化出RNA,通常OD260/OD280及OD260/OD230比值达2.0左右,DNA含量极低,且提取过程无需巯基乙醇和酚/氯仿等严重危害健康及环境的试剂。根据材料不同单柱通常可提取总RNA达2-15 ug.

提取过程:

1.  破碎材料液氮冷冻震荡或研磨破碎植物材料,取20-50 mg置于离心管中干燥材料适当降低用量,加入500 ul PRA,迅速混匀后60℃温浴5分钟,室温剧烈震荡30秒。

2. 去蛋白、多糖每管加入500 ul PRB液,震荡混匀,4℃或冰上静置5 min,12000 rpm13000 g)4离心3-4分钟。移液器小心吸取上清480 ul(勿吸入杂质,宁少勿多,吸头上若粘附杂质用吸水纸揩除,移吸附柱中。

3. 吸附RNA。上清中加入1/3体积(约160 ul)漂洗液(首次使用前需先加入乙醇)混匀,以12000 rpm4离心2分钟,弃滤液

4. 漂洗。柱上加入600 ul 漂洗液,12000 rpm4离心2分钟,弃滤液。重复漂洗一次。

5. 晾柱。室温数分钟,使残余乙醇全部挥发。

6.   洗脱。将吸附柱放至收集管中,膜上悬空滴加30-50 ul 0.1%DEPC灭菌水,室温微振片刻,12000 rpm离心2分钟得产物RNA,置冰上备用或超低温冻存

 
 
脚注信息
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