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植物基因组DNA提取试剂盒(柱式)F1507-50T/100T/200T
   该试剂盒采用独特的裂解缓冲体系,可简便高效地完成DNA释放和去除高分子杂质,后经吸附、漂洗和洗脱,可方便快捷地从各种植物,包括大多数多糖多酚植物和种子材料中提取DNA,OD260/OD280及A260/A230比值达1.7-2.0,且提取过程无需巯基乙醇和氯仿等有害健康的试剂。

 DNA提取操作步骤

1. 破碎材料

a. 离心管中放入植物材料10-40 mg,液氮冷冻研磨或震荡破碎,加入400 ul PDA,同时加入RNAse A 10 ul,震荡混匀

b. 或将10-40 mg植物材料和400 ul PDA加入1.5 ml离心管,同时加入RNase A用小研磨棒研磨均匀。

2. 释放出DNA。将含混合物的离心管置于室温或50℃温浴(冬季推荐温浴)放置5-15分钟(干燥材料放置10-20分钟),间或摇动,促进DNA释放。然后剧烈震荡30秒。

3. 去杂质。每管加入400 ul PDB液,震荡混匀,室温静置5分钟。以≧12000 rpm≧13000 g)离心3-4 min小转头适当提高转速和离心时间)。若离心后漂浮物较多,可略微摇晃后再次离心3分钟,可有效减少漂浮物。移液器吸取上清400 ul,注意勿吸入杂质,吸头上若粘附杂质需用吸水纸揩除,移上清至吸附柱中

4. 吸附。上清中加入1/2体积(200 ul)无水乙醇,盖好,混匀。≧12000 rpm离心2 min

5. 去盐。弃滤液,吸附柱中加入600 ul 漂洗液(即60%乙醇,首次使用前按标注加入无水乙醇),≧12000 rpm离心2 min。 

6. 第二次去盐。弃滤液,吸附柱中加入600 ul 漂洗液,≧12000 rpm离心2 min。

7. 去乙醇。取出吸附柱,开盖,使残余乙醇挥发。

8. 洗脱。将吸附柱放置到新的无菌离心管中,吸附膜上悬空滴加30-100 ul灭菌水,12000 rpm离心2 min,将DNA收集到离心管中

 
 
脚注信息
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